Sicurezza ed efficacia del trasferimento genico AAV-mediato di Calpaina 3 in un modello murino di distrofia muscolare dei cingoli tipo 2A

Marc Bartoli, Carinne Roudaut, Samia Martin, Franc¸oise Fougerousse, Laurence Suel,
Je´roˆme Poupiot, Evelyne Gicquel, Fanny Noulet, Olivier Danos, and Isabelle Richard
Mol Ther. 2006 Feb;13(2):250-9. Epub 2005 Nov 14


Sicurezza ed efficacia del trasferimento genico AAV-mediato di Calpaina 3 in un modello murino di distrofia muscolare dei cingoli tipo 2A
La distrofia muscolare dei cingoli tipo 2A (LGMD2A) è una patologia muscolare a trasmissione autosomico recessiva causata dal deficit della proteasi calpaina 3 cisteina calcio-dipendente. Ad oggi, non esiste nessun trattamento per questa malattia. Abbiamo valutato le potenzialità del virus adeno-associato ricombinante (rAAV), vettore per la terapia genica, in un modello murino di LGMD2A. Per guidare l’espressione della calpaina 3, abbiamo usato rAAV2/1 vettori e promotori muscolo-specifici per evitare la tossicità cellulare della calpaina 3 stessa. Abbiamo ottenuto un’espressione del transgene stabile ed efficiente nel muscolo, con ripristino dell’attività proteolitica e senza tossicità evidente. In aggiunta, calpaina 3 è stata correttamente mirata al sarcomero. Inoltre, il trasferimento genico ha portato ad un miglioramento delle caratteristiche istologiche e ad una efficacia terapeutica a livello fisiologico, tra cui la correzione dell’atrofia ed il recupero completo del deficit contrattile. I nostri risultati stabiliscono la fattibilità del trasferimento genico mediato da vettori adenovirali (AAV) del gene calpaina 3 come un possibile approccio terapeutico

Safety and Efficacy of AAV-Mediated Calpain 3Gene Transfer in a Mouse Model of Limb-Girdle Muscular Dystrophy Type 2A
Calpainopathy (limb-girdle muscular dystrophy type 2A, LGMD2A) is a recessive muscular disorder caused by deficiency in the calcium-dependent cysteine protease calpain 3. To date, no treatment exists for this disease. We evaluated the potential of recombinant adeno-associated virus (rAAV)vectors for gene therapy in a murine model for LGMD2A. To drive the expression of calpain 3, weused rAAV2/1 pseudotyped vectors and muscle-specific promoters to avoid calpain 3 cell toxicity. We report efficient and stable transgene expression in muscle with restoration of the proteolytic activity and without evident toxicity. In addition, calpain 3 was correctly targeted to the sarcomere. Moreover, its presence resulted in improvement of the histological features and in therapeuticefficacy at the physiological levels, including correction of atrophy and full rescue of the contractile force deficits. Our results establish the feasibility of AAV-mediated calpain 3 gene transfer as a
therapeutic approach.